洁净手术室的操作原则如下：

　　一、层流手术室需使用经过相关部门检验合格的杀菌消毒剂，对手术室内的所有手术用设备以及手术床、柜等手术室内用品进行全面清理，保持每天早上都重复这一工作。

　　二、层流手术室要将每次使用过的医生服装、手术巾、床单、鞋套、口罩和手套进行全面的清理，对手术室容器进行全面的杀菌消毒。

　　三、除了更换清理每次手术过程中使用过的医疗器械如:手术刀、镊子夹等手术用品外，洁净手术室还应对手术室内大型设备以及手术室无影灯等固定使用的手术室器材进行杀菌消毒。

　　四、使用吸尘器配合无尘拖把，对手术室地面进行杀菌消毒，移动手术室内所有的可以动的手术床、柜等物品，对手术室地面进行全面的清理，用吸尘器将手术室内所有的碎屑等物吸附干净，用消毒液覆盖整个手术室，保持10到15分钟，然后将地板擦拭干净，不留死角。

　　五、洁净手术室对死角要着重清理，消毒液渗透到死角表面，并将脏水用吸尘器吸干。

　　六、用干净水冲洗拖把，将手术室充分拖净并吸干。

　　七、将手术室内的手术床、柜等活动物品归位。

　　八、每天都应对手术室内的墙壁悬挂物如:挂的较低的手术室无影灯、手术柜、手术床的表面以及底面、车轮以及洁净手术室内各类容器进行杀菌消毒处理。